Trombożi tax-shunt AV fl-NHPs: interpretazzjoni tal-punti finali tal-fluss, trombu u fsada
L-ammont ta 'embolu rkuprat fit-tmiem ta' studju ta 'trombożi ta' shunt arteriovenuża (AV) huwa qari wieħed fost diversi. Fi aMudell ta' shunt AV ta' primati mhux umani (NHP)., id-demm jgħaddi minn segment tat-test extrakorporali definit taħt il-fluss. Is-setup tappoġġja l-valutazzjoni tal-imġieba tal-fluss u l-formazzjoni tat-trombu fuq wiċċ li jikkuntattja d-demm, u l-endpoints tal-emostasis komplementari jiddeskrivu n-naħa tas-sigurtà ta 'rispons antitrombotiku.
Dan il-kejl iwieġeb mistoqsijiet differenti. Il-fluss jindika jekk it-trombu li qed jiżviluppa hux qed jaffettwa l-patency. Il-piż tat-trombu jiddeskrivi materjal depożitat fuq jew ġewwa s-segment tat-test.Fsada u emostasiil-miżuri juru jekk l-inibizzjoni tat-trombożi tiġix b'effett eċċessiv fuq l-emostasi normali. L-ebda endpoint uniku ma jkopri t-tliet dimensjonijiet tal-farmakoloġija.
X'jkejjel il-mudell AV shunt
Mudelli ta' trombożi ta' shunt AVpoġġi apparat tat-test jew segment tat-tilqim f'ċirkwit li jesponih għad-demm li joħroġ. Kuntatt ma 'wiċċ barrani, ġeometrija lokali u l-kamp tal-fluss li jirriżulta jibdew l-adeżjoni tal-plejtlits u l-attivazzjoni, il-koagulazzjoni u l-formazzjoni tal-fibrina. Il-bilanċ fost dawn il-proċessi jiddependi fuq l-oġġett tat-test, il-materjal tal-wiċċ, il-ġeometrija tal-apparat u l-kundizzjonijiet emodinamiċi, kif ukoll l-istat ematoloġiku tal-linja bażi tal-annimal.
Xogħol storiku stabbilixxa l-fattibbiltà tal-kejl tal-formazzjoni ta 'trombus fix-xadini rhesus bl-użu ta' apparati tat-test esposti għad-demm fi shunts arterjoarterial jew arteriovenuża. Fi studju wieħed, trombu depożitat waqt esponiment definit kien kwantifikat gravimetrikament; il-ġeometrija u l-materjal tal-apparat influwenzaw l-ammont irkuprat, u l-investigaturi rrappurtaw fluss aktar prevedibbli fl-AV milli fil-konfigurazzjoni arterjoarterial.[1] Studju relatat uża l-mudell biex iqabbelaġenti antitrombotiċiu kejl gravimetriku kombinat tat-trombu ma' valutazzjoni ultrastrutturali.[2] Dawn l-istudji jipprovdu prova ta 'prinċipju, mhux protokoll lest jew firxa ta' referenza universali għal studju NHP kontemporanju.
Ittratta l-mudell bħala sfida tromboġenika akuta kkontrollata mibnija madwar il-fluss tad-demm u wiċċ definit li jikkuntattja d-demm. Ma jirriproduċix kull karatteristika ta 'trombożi arterjali jew venuża spontanja fil-pazjenti. Endpoint ta' embolu assoċjat ma' apparat m'għandux jinqara bħala prokura diretta għal qsim tal-plakka, tromboemboliżmu fil-vini, puplesija, infart mijokardijaku jew falliment kliniku tat-trapjant.
Tliet oqsma endpoint, u għaliex għandhom jibqgħu distinti
1. Fluss u shunt patency
Il-fluss huwa qari funzjonali tal-interazzjoni li qed tevolvi bejn it-trombu u ċ-ċirkwit tat-test. Skont id-disinn tal-istudju, sommarji utli jinkludu l-linja bażi u l-profil tal-fluss tas-serje, il-bidla mil-linja bażi, fluss maż-żmien, jew ħin għal tnaqqis jew interruzzjoni tal-fluss speċifikat minn qabel. Jekk il-fluss jiġi mmonitorjat kontinwament, id-dejta turi meta tibda bidla u jekk hijiex sostnuta, informazzjoni li kejl terminali waħdu ma jistax jipprovdi.
Il-fluss għandu jiġi interpretat fir-rigward tas-sistema tal-kejl. It-tqegħid tas-sonda, ir-reżistenza taċ-ċirkwit, id-dimensjonijiet tal-apparat, il-kundizzjonijiet tal-pressjoni, it-temperatura u l-interruzzjonijiet tekniċi jaffettwaw is-sinjal irreġistrat. Protokoll għandu jiddefinixxi l-firxa tal-linja bażi aċċettabbli, kif l-artifacts tas-sinjali huma mmaniġġjati u x'jikkostitwixxi tnaqqis interpretabbli fil-fluss qabel ma jitqabblu l-gruppi ta 'trattament. "Ħin għall-okklużjoni" huwa sinifikanti biss meta l-limitu u t-tieqa ta' osservazzjoni huma speċifikati minn qabel u l-mudell jilħaq dak l-avveniment b'mod affidabbli taħt il-kundizzjonijiet magħżula.
Massa ta 'trombus aktar baxxa ma tipprovax li l-fluss kien ippreservat, u l-fluss ippreservat ma jipprovax li ffurmat trombu żgħir. Depożitu mhux okklussiv jinbena mingħajr bidla f'daqqa fil-fluss; depożitu li jinsab strateġikament ifixkel il-fluss minkejja massa totali modesta. Il-fluss u l-piż tat-trombus huma endpoints komplementari, u l-ebda wieħed ma jissostitwixxi l-ieħor.
2. Piż tat-trombu u kompożizzjoni
Il-valutazzjoni tat-trombu terminali tikkwantifika l-materjal iffurmat fuq jew fi ħdan is-segment tat-test. Il-kejl gravimetriku huwa approċċ dirett u stabbilit fil-letteratura storika tal-primati, iżda r-riżultat jiddependi fuq l-irkupru, l-immaniġġjar u l-użin standardizzati. Il-protokoll għandu jispeċifika jekk l-endpoint imkejjel huwiex massa mxarrba jew ipproċessata, kif id-demm residwu jiġi indirizzat, u jekk ir-riżultati humiex normalizzati għal karatteristika rilevanti tal-apparat bħal żona esposta jew tul ta' espożizzjoni. Dawn l-għażliet għandhom ikunu konsistenti bejn il-gruppi u rrapportati bl-istess mod.
Il-quddiesa waħedha ma tikxefx x’fih it-trombu jew kif ifforma. Fejn iġġustifikat xjentifikament, immaġini jew mikroskopija u valutazzjoni mmirata tal-komponenti tal-plejtlets u l-fibrina jżidu kuntest mekkanistiku. Tali analiżi jgħinu biex jiddistingwu bidla fid-depożizzjoni ġenerali minn bidla fil-kontribuzzjoni relattiva ta 'materjal b'ħafna plejtlits u fibrina. Iddefinixxi l-metodu, il-post tat-teħid tal-kampjuni u l-approċċ tal-punteġġ minn qabel, u ittratta qari tal-morfoloġija esploratorja bħala esploratorja sakemm tkun ikkwalifikata.
Sett ta' endpoint utli jgħaqqad l-osservazzjoni fiċ-ċirkwit mal-kampjun irkuprat: trajettorja tal-fluss waqt l-espożizzjoni, ammont ta' trombu fl-endpoint u, fejn inkluż, karatterizzazzjoni tal-kompożizzjoni tat-trombu. Dik is-sekwenza tagħti qari aktar sħiħ minn piż terminali wieħed.
3. Fsada u emostasi
Attività antitrombotika u tagħhaeffetti fuq l-emostasijappartjenu fl-istess analiżi. Studju tipikament jgħaqqad osservazzjonijiet kliniċi ta 'fsada, valutazzjoni ta' aċċess jew siti proċedurali, miżura ta 'fsada definita mill-protokoll, u data tal-laboratorju jew farmakodinamika rilevanti għall-mekkaniżmu tal-mediċina. Il-panel preċiż isegwi l-artikolu tat-test u l-mistoqsija tal-istudju aktar milli mudell ikkupjat minn speċi oħra jew klassi tal-farmakoloġija.
Il-ħin tal-fsada, meta jintuża, huwa miżura dipendenti mill-kuntest affettwata mill-metodu u l-eżekuzzjoni; mhijiex stima diretta tar-riskju kliniku ta' fsada. Bl-istess mod, it-testijiet ta' rutina tal-koagulazzjoni, l-għadd tal-plejtlits jew l-analiżi tal-funzjoni tal-plejtlits kull wieħed jaqbad biss parti mill-emostasi u mhumiex ugwalment sensittivi għal kull mekkaniżmu. L-interpretazzjoni hija aktar b'saħħitha meta l-osservazzjonijiet huma kkombinati ma' data ta' espożizzjoni u farmakodinamika, bħall-assaġġ rilevanti tal-koagulazzjoni jew tal-mogħdija tal-plejtlits, aktar milli t-trattament ta' kwalunkwe riżultat tal-laboratorju wieħed bħala konklużjoni sħiħa dwar is-sigurtà.
L-endpoints tal-fsada jeħtieġu wkoll approċċ standardizzat u anbenesseri tal-annimalireviżjoni fl-NHPs. Il-protokoll għandu jiddikjara kif l-avvenimenti huma osservati u kklassifikati, il-perjodu ta 'osservazzjoni rilevanti, kriterji għal segwitu jew intervent, u kif il-fsada proċedurali hija distinta minn sinjal relatat mad-droga. Sejba ta' trombożi mnaqqsa mingħajr l-ebda fsada skoperta fi studju żgħir ma tappoġġjax talba ta '"ebda riskju ta' fsada."
Ibni pakkett endpoint madwar il-kwistjoni tal-farmakoloġija
L-għażla tal-endpoint issegwi d-deċiżjoni maħsuba. Programm kontra l-plejtlits normalment jeħtieġ depożizzjoni jew funzjoni tal-plejtlits, fluss, u valutazzjoni tal-emostasi. Programm antikoagulant jixgħel il-farmakodinamiċi u l-espożizzjoni tal-mogħdija tal-koagulazzjoni, li huma li jagħmlu bidla fil-formazzjoni tat-trombus interpretabbli. Apparat li jimmodifika l-wiċċ ipoġġi l-enfasi fuq id-depożizzjoni speċifika għall-materjal u l-karatterizzazzjoni tal-wiċċ. F'kull każ l-endpoints jittraċċaw lura għall-mekkaniżmu ta 'azzjoni u għal-limiti tal-mudell.
Studju ta’ shunt AV koerenti tipikament jallinja erba’ flussi ta’ informazzjoni:
- Rispons funzjonali:imġieba tal-fluss u kwalunkwe miżura ta' patency jew okklużjoni speċifikata minn qabel.
- Rispons ta' trombu:ammont iddepożitat, bil-kompożizzjoni jew il-morfoloġija evalwata meta jkun iġġustifikat.
- Farmakoloġija:espożizzjoni tal-oġġett tat-test u kejl farmakodinamiku rilevanti għall-mekkaniżmu f'punti ta' ħin interpretabbli.
- Kuntest emostatiku:osservazzjonijiet kliniċi ta' fsada u laboratorju magħżula jew miżuri funzjonali xierqa għall-kandidat.
Il-pjan ta' analiżi għandu jidentifika l-endpoint primarju u jiddistingwih minn miżuri ta' appoġġ jew esploratorji. Randomization, valutazzjoni blinded fejn fattibbli, kundizzjonijiet ta' kontroll,ġustifikazzjoni tad-daqs tal-kampjunu l-immaniġġjar predefinit ta' fallimenti tekniċi jnaqqsu l-inċertezza interpretattiva. Fejn jiġu kkunsidrati espożizzjoni ripetuta jew paraguni fi ħdan l-annimali, id-disinn għandu jikkunsidra t-trasferiment, il-ħasil u l-varjabbiltà bijoloġika tal-punti finali magħżula.
Sorsi ta' varjabbiltà li jibdlu r-riżultat
Riżultat ta' trombożi ta' shunt AV huwa speċifiku għall-konfigurazzjoni sperimentali. Il-materjal u l-ġeometrija tal-apparat, l-erja tal-wiċċ esposta, id-dimensjonijiet taċ-ċirkwit, il-kundizzjonijiet tal-fluss, it-tul tal-espożizzjoni u l-ġestjoni peri-proċedurali kollha jinfluwenzaw il-formazzjoni tat-trombu. Fatturi bijoloġiċi, inklużi l-għadd u l-funzjoni tal-plejtlits, l-ematokrit, l-istat tal-koagulazzjoni, l-ispeċi, il-varjabbiltà individwali u l-mediċini konkomitanti, jaffettwaw ukoll ir-rispons.
Dawn il-fatturi mhumiex biss dettalji tekniċi. Jekk ivarjaw bejn gruppi jew perjodi ta 'studju, ibiddlu l-effett apparenti tat-trattament. Ematoloġija bażi, preparazzjoni u tqandil konsistenti tal-apparat, kejl tal-fluss kalibrat, standardizzazzjoni proċedurali u dokumentazzjoni kompleta huma parti mill-validità tal-endpoint. Protokoll għandu jiddefinixxi wkoll kif interruzzjoni mhux mistennija tal-fluss, ħsara fl-apparat jew formazzjoni inadegwata ta' trombu se jiġu rreġistrati u trattati fl-analiżi.
Il-kuntest tal-NHP iżid valur meta l-istudju jeħtieġ valutazzjoni integrata in vivo tal-espożizzjoni, il-farmakoloġija u r-rispons emostatiku f'primat. Ma teliminax il-ħtieġa ta' kwalifika ta' mudell. Studji storiċi rhesus juru li shunts AV jappoġġjaw studji ta 'ġenerazzjoni ta' trombus u effetti antitrombotiċi, iżda ma jistabbilixxux li r-riżultati jittrasferixxu mhux mibdula għal speċi oħra, konfigurazzjoni ta 'apparat, klassi kompost jew setting ta' studju kontemporanju.[1,2]
Interpretazzjoni translazzjonali: profil benefiċċju-riskju
Konklużjoni li kandidat "tnaqqas it-trombożi" ftit jgħid waħdu. Il-mistoqsijiet huma jekk it-tnaqqis werax fil-fluss, fil-piż tat-trombu, jew fit-tnejn; jekk issegwix l-espożizzjoni tad-droga u l-mekkaniżmu farmakodinamiku mistenni; u dak li turi d-dejta tal-emostasi fuq l-istess medda ta 'espożizzjoni. Id-discordanza fost l-endpoints hija informattiva, u ġeneralment tirrifletti differenzi fis-sensittività, iż-żmien, il-lok tal-embolu jew il-mekkaniżmu aktar milli esperiment fallut.
Mudell ta' trombożi ta' shunt AV NHP jikkontribwixxi għall-valutazzjoni preklinika tal-farmakoloġija antitrombotika meta l-konfigurazzjoni u l-punti ta' tmiem tagħha jkunu mqabbla mad-deċiżjoni preżenti. Is-saħħa tagħha tinsab li jġib il-fluss, it-trombu assoċjat mal-apparat u l-farmakoloġija sistemika f'kuntest sperimentali wieħed. Il-limiti tiegħu huma importanti daqstant: huwa mudell akut, dipendenti mill-konfigurazzjoni u ma jistax waħdu jistabbilixxi effikaċja klinika, riskju kliniku ta 'fsada jew benefiċċju terapewtiku f'popolazzjoni speċifika ta' pazjenti.
Għat-timijiet tat-traduzzjoni, il-prijorità prattika hija li tiddefinixxi l-mistoqsija l-ewwel, imbagħad agħżel punt tat-tmiem tal-fluss, punt tat-tmiem tat-trombus u pakkett emostasi ddisinjat biex jinqraw flimkien. Dak l-allinjament, mhux in-numru ta’ kejl, jiddetermina jekk l-istudju jipproduċix evidenza rilevanti għad-deċiżjoni.
Mistoqsijiet frekwenti
Q: X'jkejjel mudell ta' trombożi shunt AV NHP?
A: Jevalwa l-formazzjoni ta 'trombu fuq jew fi ħdan segment definit tat-test li jikkuntattja d-demm taħt fluss f'NHP. Skont il-protokoll, l-endpoints jinkludu l-imġieba tal-fluss, il-piż tat-trombu irkuprat, il-kompożizzjoni tat-trombu, l-espożizzjoni tad-droga, l-attività farmakodinamika u l-effetti emostatiċi.
Q: Għaliex tkejjel il-fluss kif ukoll il-massa tat-trombu?
A: Il-fluss jiddeskrivi l-patency funzjonali matul l-esperiment, filwaqt li l-massa tat-trombu tikkwantifika l-materjal depożitat fil-punt tat-tmiem tal-ġbir. Il-miżuri huma relatati iżda mhux interkambjabbli: it-trombu kultant jakkumula mingħajr okklużjoni, u embolu żgħir li jinsab strateġikament jaffettwa l-fluss b'mod sproporzjonat.
Q: Il-piż tat-trombu aktar baxx ifisser riskju aktar baxx ta' fsada?
A: Le. L-effikaċja antitrombotika u l-fsada huma oqsma farmakoloġiċi relatati li għandhom jitkejlu separatament. Studju għandu jinkludi valutazzjoni tal-emostasi xierqa għall-mekkaniżmu, u tnaqqis fil-piż tat-trombu waħdu ma jistabbilixxix assenza ta' riskju kliniku ta' fsada.
Q: Jistgħu r-riżultati tax-shunt AV ibassru r-riżultati kliniċi tat-trombożi?
A: Huma jipprovdu evidenza preklinika dwar attività antitrombotika f'konfigurazzjoni definita ta 'apparat u fluss. Huma, waħedhom, ma jbassrux riżultati kliniċi jew jirriproduċu l-mekkaniżmi kollha ta 'trombożi arterjali jew venuża spontanja.
Referenzi
- Mason RG, Wolf RH, Zucker WH, Shinoda BA.Mudell ta 'shunt vaskulari ta' primati mhux umani għall-ġenerazzjoni ta 'trombus.Investigazzjoni tal-Laboratorju. 1976;34(6):558-564.PubMed PMID: 819713.
- Mason RG, Wolf RH, Zucker WH, Shinoda BA, Mohammad SF.Effetti ta' aġenti antitrombotiċi evalwati f'mudell ta' shunt vaskulari ta' primati mhux umani.Ġurnal Amerikan tal-Patoloġija. 1976.PubMed PMID: 820202; test sħiħ.
